Spermatogonium in adult´s testicles: new source of stem cells
Horacio Merchant Larios, Departamento de Biología Celular y Fisiología, IIBMEn contraste con las ovogonias en los ovarios fetales, las espermatogonias de los testículos se mantienen proliferando hasta la muerte del individuo. En condiciones normales, la función de las espermatogonias progenitoras, es la producción de espermatozoides mediante el proceso de espermatogénesis. El “nicho” tisular donde se lleva a cabo la espermatogénesis son los tubos seminíferos, constituidos por células germinales en diversas etapas de maduración y las células de Sertoli que las sustentan. Además del contacto físico, las esperma-togonias requieren de múltiples factores elaborados por las células de Sertoli para la diferenciación de espermatozoides. De manera que hasta ahora, no ha sido posible reproducir el proceso completo de espermatogénesis a partir de espermatogonias aisladas in vitro. En la literatura existen varios estudios que reportan la proliferación in vitro de espermatogonias aisladas; sin embargo, su mantenimiento es limitado y pronto mueren por apoptosis.
Aprovechando la tecnología de ratones transgénicos, K. Guan y colaboradores (11 autores:coreanos, chinos y alemanes), desarrollaron un protocolo que permitió demostrar la presencia de células troncales multipotentes entre las espermatogonias aisladas de ratones adultos.
El gen Stra8 se expresa en las espermatogonias antes de iniciarse el proceso de espermatogénesis. Empleando el promotor del gen Stra8 acoplado al gen de la proteína verde fluorescente (PVF), los autores generaron ratones transgénicos en cuyos testículos las espermatogonias expresan la PVF de manera específica. Además de ser detectadas con facilidad mediante el microscopio de flourescencia también es posible separarlas con el citofluorómetro de flujo (FACS). Al cruzar los ratones Stra8-PVF con ratones transgénicos Rosa26 que expresan la enzima LacZ en todas sus células, obtuvieron dobles transgénicos con células marcadas susceptibles de ser separadas e identificadas por sus marcadores celulares correspondientes.
En los testículos de ratones adultos existen células troncales multipotentes capaces de originar todos los tipos celulares del organismo
Al cultivar las células (somáticas y germinales) obtenidas de los testículos de ratones dobles transgénicos (Stra8-PVF x LacZ), los investigadores lograron en dos semanas poblaciones celulares enriquecidas con espermatogonias “verdes”. A continuación, con el equipo FACS separaron las células verdes y las sometieron a diversos procedimientos encaminados a estudiar su plasticidad. Tres de esos procesos demostraron la enorme potencialidad de las espermatogonias aisladas con el protocolo implementado por los autores: 1) Al cultivarlas en condiciones estándar establecidas para el mantenimiento de células troncales embrionarias, los investigadores demostraron que las espermatogonias son capaces de generar derivados celulares de las tres capas embrionarias: ectodermo, mesodermo y endodermo. Es decir se obtuvieron células diferenciadas de músculo cardiaco, músculo esquelético, neuronas, vasos sanguíneos, etcétera. 2) Los experimentos in vivo, demostraron que las espermatogonias verdes fluorescentes inyectadas en los tubos seminíferos de ratones privados de sus propias esper-matogonias, fueron capaces de colonizar los tubos y llevar a cabo el proceso de espermatogénesis. 3) Aún más, al microinyectar espermatogonias verdes en la cavidad de blastocistos (embriones preimplantados), se desarrollaron em-briones quiméricos cuyos tejidos mostraron células con el marcador verde en casi todos los órganos, incluidas las gónadas. Al nacer, algunos ratones quiméricos contenían células germinales verdes, con lo cual quedó demostrada la enorme potencialidad de las espermatogonias del ratón y la eficiencia del procedimiento empleado.Comments (0)
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